Što je značenje PCR detekcije nukleinske kiseline, metode i koraci
Testiranje nukleinske kiseline trenutno je učinkovit način da se utvrdi prenosi li virus novi koronavirus. Trenutno ljudi uglavnom koriste briseve nosa, briseve grla i serum antitijela lgm kao referencu. No, prema najnovijim zahtjevima za ulazak u Singapur, provodi se PCR testiranje nukleinske kiseline, pa što znači testiranje PCR nukleinske kiseline?
Što je značenje PCR detekcije nukleinske kiseline
PCR znači lančanu reakciju polimeraze, koja se može upotrijebiti za amplifikaciju DNA, tako da se umnoži mala količina DNA do mjere u kojoj se može detektirati. Nukleinska kiselina nekih virusa je DNK, a za detekciju je potrebno koristiti ovu metodu. Dakle, PCR nije izvršena provjera, već metoda detekcije DNK. Na primjer, kvantifikacija DNK virusa hepatitisa B koristi ovu metodu. Svrha DNK inspekcije je s jedne strane dijagnosticirati bolest. Ako se čak i DNK patogena može otkriti, to znači da je patogen zaražen; s druge strane, potrebno je prosuditi koliko se virus replicirao, kako bi se procijenila težina bolesti ili učinak liječenja.
Metode i koraci detekcije PCR nukleinske kiseline
Testiranje nukleinske kiseline zahtijeva pet koraka: uzorkovanje, zadržavanje uzorka, zadržavanje, ekstrakcija nukleinske kiseline i kompjutersko testiranje.
Prvi korak u detekciji nukleinske kiseline je prikupljanje ljudskog izlučevina, te brisanje nosne šupljine ili stražnje stijenke ždrijela i obostranih ždrijelnih tonzila nazalnim testom ili faringealnim testom.
U drugom koraku, medicinsko osoblje je zadržalo uzorak, uronilo glavu uzorka u otopinu za konzerviranje stanica i zašrafilo čep epruvete odmah nakon lomljenja repa.
U trećem dijelu uzorak staviti u hermetičku vrećicu, čuvati i na vrijeme poslati na pregled.
Četvrti korak je slanje uzorka u laboratorij za ekstrakciju nukleinske kiseline.
U petom koraku, ekstrakt je podvrgnut reakciji fluorescentne PCR amplifikacije.
Što je nukleinska kiselina
Nukleinska kiselina (nukleinska kiselina) je vrsta biološke makromolekule sastavljene od nukleotida (nukleotida), podijeljenih na ribonukleinsku kiselinu (RNA) i deoksiribonukleinsku kiselinu (DNK), u kojoj je RNA uglavnom jednolančana struktura, DNK je uglavnom dvolančana struktura. Osim priona, nukleinska kiselina je biološka makromolekula neophodna za život. Njegova glavna funkcija je konstituirati genetski nositelj informacija života. Osim toga, neke nukleinske kiseline mogu se koristiti kao i sudjelovati u stvaranju biološki aktivnih enzima. Molekule ili drugi molekularni strojevi.
Što je testiranje nukleinske kiseline
Detekcija nukleinskih kiselina, kao što naziv implicira, je otkrivanje nukleinskih kiselina.
Koje su jedinstvene prednosti testiranja nukleinskih kiselina? Zašto se može koristiti kao"zlatni standard" za dijagnozu novog koronavirusa?
Zapravo, svaka metoda detekcije ima svoje scenarije primjene. Uzimajući za primjer otkrivanje virusa, objekt detekcije uobičajenih imunoloških metoda detekcije (koloidno zlato, ELISA, kemiluminiscencija, itd.) je antigen ili antitijelo virusa, što je ekvivalentno"bočnom crtežu". Budući da postoji vremenski okvir od infekcije do otkrivanja, imunološke metode otkrivanja općenito nisu prikladne za ranu dijagnozu.
Što je značenje PCR detekcije nukleinske kiseline, metode i koraci
Lažno pozitivni i lažno negativni
1. Lažno pozitivan
Obično je manje lažnih pozitivnih rezultata. Općenito, nepravilan rad laboratorijskog osoblja može dovesti do unakrsne kontaminacije između uzoraka ili preostale kontaminacije pojačanih proizvoda. U tom slučaju može doći do lažnih pozitivnih rezultata.
Međutim, lažno pozitivni rezultati mogu se učinkovito zaobići strogom kontrolom procesa detekcije i provedbom strategije nasumičnog sudjelovanja u otkrivanju nekoliko negativnih uzoraka.
2. Lažno negativan
Ovdje treba objasniti da lažno negativni rezultati u PCR detekciji i klinički lažno negativni zapravo nisu isti koncept.
Uzimajući za primjer dijagnozu novog koronavirusa o kojoj se intenzivno raspravlja na internetu, klinički lažno negativni odnosi se na slučajeve u kojima se sumnja da su klinički simptomi i slikovne studije zaraženi, ali je PCR test opetovano ili uvijek negativan; a PCR test lažno negativan odnosi se na prikupljeni U uzorku postoji dovoljna količina novog koronavirusa, ali nije otkriven.
Kako bi se izbjegli lažno negativni rezultati u testiranju nukleinske kiseline, glavne stvari koje treba riješiti su: (1) ima dovoljno virusa u stanicama zaražene osobe, (2) stanice koje sadrže virus mogu se prikupiti u prikupljenom uzorku i (3) ) virus u uzorku je otkriven Ove tri veze.
Među njima, tehnički parametri PCR kompleta uglavnom utječu na treću vezu detekcije.
Samo za treću testnu vezu, ako je broj virusa u uzorku ispod određene razine (ispod minimalne granice detekcije), PCR komplet ga neće moći otkriti. Iz ove perspektive, lažno negativni rezultati u PCR detekciji ne mogu se u potpunosti izbjeći. Zbog toga je potrebno dopuniti razvoj testiranja specifičnih za virus antitijela.
