Primjena bočice seruma
Bočica seruma izrađena je od boroscilikatnog stakla niske ekstrakcije, a bezbojna bistra boca zadovoljava zahtjeve USP tipa I i ASTM E 438 Tipa I Standardna klasa A. Može se autoklavirati na 121 ° C za 20min, a može se podijeliti na 125ml, 250ml, 500ml, 1L, 2L prema volumenu.
Bočica seruma je spremnik za spremanje seruma, koji je općenito izrađen od PET materijala postupkom ubrizgavanja istezanja. Medij je hranjiva tvar potrebna za rast stanica. Prema izvoru, podijeljen je na sintetički srednji i prirodni medij, a oba se mogu pohraniti u bočice seruma.
Bočica seruma
Prirodni medij:
Najčešće korišteni prirodni medij je serum, u osnovi serum teleta. Serum sadrži različite čimbenike rasta stanica, čimbenike koji potiču prianjanje i njihove multiaktivne tvari. U kombinaciji sa sintetičkim medijem, stanice se mogu razmnožavati i rasti glatko. Serum treba čuvati u posebnim bočicama seruma na -5°C do -20°C.
Sintetički medij:
Sintetički medij strogo se formulira prema vrsti i količini tvari koje zahtijevaju stanice. Postoje mnoge vrste i poznate komponente, što olakšava kontrolu eksperimentalnih uvjeta. Sadrži ugljikohidrate, aminokiseline, lipide, anorganske soli, vitamine, elemente u tragovima i čimbenike rasta stanica. Međutim, u usporedbi s prirodnim medijem, neke prirodne nepoznate komponente ne mogu se zamijeniti poznatim kemijskim komponentama. Stoga osnovni sintetički medij koji se koristi u staničnoj kulturi također mora dodati određenu količinu prirodnih srednjih komponenti za prevladavanje sintetičke kulture. Nedovoljna baza, najčešća praksa je dodavanje seruma za tele.
Oblik bočice seruma je kvadratni, jednostavan za hvatanje, otporan na većinu korozije kiselina i lužina, temperatura embrittlementa je -70 °C, a još uvijek ima određenu žilavost na -30 °C. To je dobar spremnik za pakiranje, bilo da se radi o prirodnoj srednjoj ili sintetičkoj kulturi. može se čuvati u bočicama seruma.
Za izolaciju, kulturu i identifikaciju endotelnih progenitornih stanica krvi ljudske pupkovine i uspostavljanje staničnih vaskularnih skela poboljšanom metodom zamrzavanja i odmrzavanja
Istražiti izvedivost i kliničku vrijednost primjene endotelnih progenitornih stanica izoliranih i kultiviranih iz krvi ljudske pupčane vrpce.
Metode: Prikupljena je krv pupčane vrpce fetusa koji se podvrgavaju cjelodnevnom carskom rezu na Odjelu za porodništvo i ginekologiju, prva povezana bolnica Medicinskog fakulteta u Bengbuu, stavljena u bočicu seruma koja sadrži heparin od 50U /ml u aseptičkim uvjetima, pohranjena u ledenoj kutiji od 4 °C i prevezena u stanice U sobi za kulturu, mononuklearne stanice krvi pupčane vrpce dobivene su centrifugiranjem gradijenta gustoće. Dobivene mononuklearne stanice podijeljene su u dva dijela, a dodani su fetalni teleći serum M199 medium (FCS-M199) i autologni serum M199 medium (AS-M199). I bili su zasijani u kulturnim jelima sa i bez ljudskog fibronektina (HFN) (označenog kao: F(0), F(1), A(0), A(1)). Provedena je in vitro indukcija, diferencijacija i ekspanzija.
Uočene su morfološke promjene prianjajućih stanica tijekom cijelog procesa indukcije i diferencijacije, a identificirane su iz različitih kutova u kombinaciji sa srodnim tehnikama kao što su imunohistokemija, imunofluorescencija i protočna citometrija.
Rezultati: Nakon 12 dana kulture počele su se prianjati mononuklearne stanice krvi iz pupkovine. Nakon 3d-a počeo se pojavljivati oblik vretena, a zatim se broj prianjajućih stanica postupno povećavao i postupno postao vretenastog oblika. Kada se uzgaja do tjedan dana, formirana je tipična kolonija sa stanicama vretena oko i okruglim stanicama u sredini. Kada su stanice bile kultivirane 14 dana, međusobno povezane stanične nakupine postupno su se povezale i formirale strukturu sličnu mreži. Istodobno, s kontinuiranim povećanjem vremena kulture, duge stanice vretena također su se počele postupno skraćivati i pokazivale su tipičnu promjenu nalik kamenu za popločavanje.
Prianjajuće stanice bile su kultivirane tjedan dana i uočeno je da je broj stanica u mediju s ljudskim fibronektinom znatno veći od broja bez ljudskog fibronektina, te nije bilo značajne promjene u broju stanica u dva različita medija. #Instrument potrošni materijal #
